Examinando por Materia "Biotechnology"
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- PublicaciónAcceso abiertoA novel method for isolation and culture of primary swine gastric epithelial cells(2021-01-06) Bautista-Amorocho, Henry; Silva-Sayago, Jorge Alexander; Goyeneche-Patino, Diego A.; Pérez-Cala, Tania Liseth; Macías-Gómez, Fabio; Arango-Viana, Juan Carlos; Martínez, Alonso; CliniUDESBackground: Culturing primary epithelial cells has a major advantage over tumor-derived or immortalized cell lines as long as their functional phenotype and genetic makeup are mainly maintained. The swine model has shown to be helpful and reliable when used as a surrogate model for human diseases. Several porcine cell lines have been established based on a variety of tissues, which have shown to extensively contribute to the current understanding of several pathologies, especially cancer. However, protocols for the isolation and culture of swine gastric epithelial cells that preserve cell phenotype are rather limited. We aimed to develop a new method for establishing a primary epithelial cell culture from the fundic gland region of the pig stomach. Results: Mechanical and enzymatic dissociation of gastric tissue was possible by combining collagenase type I and dispase II, protease inhibitors and antioxidants, which allowed the isolation of epithelial cells from the porcine fundic glands showing cell viability > 90% during the incubation period. Gastric epithelial cells cultured in RPMI 1640, DMEM-HG and DMEM/F12 media did not contribute enough to cell adhesion, cluster formation and cell proliferation. By contrast, William’s E medium supplemented with growth factors supports confluency and proliferation of a pure epithelial cell monolayer after 10 days of incubation at 37 °C, 5% CO2. Mucin-producing cell phenotype of primary isolates was confirmed by PAS staining, MUC1 by immunohistochemistry, as well as the expression of MUC1 and MUC20 genes by RT-PCR and cDNA sequencing. Swine gastric epithelial cells also showed origin-specific markers such as cytokeratin cocktail (AE1/AE3) and cytokeratin 18 (CK-18) using immunohistochemical and immunofluorescence methods, respectively. Conclusions: A new method was successfully established for the isolation of primary gastric epithelial cells from the fundic gland zone through a swine model based on a combination of tissue-specific proteases, protease inhibitors and antioxidants after mechanical cell dissociation. The formulation of William’s E medium with growth factors for epithelial cells contributes to cell adhesion and preserves functional primary cells phenotype, which is confirmed by mucin production and expression of typical epithelial markers over time.
- PublicaciónAcceso abiertoAceleración del proceso de compostaje de residuos post-cosecha (pulpa) del café con la aplicación de microorganismos nativos(2010) Vásquez de Díaz, María Cristina; López, Andrea; Fuentes, Beatriz; Cote, ElvaColombia, as a leading exporter of coffee smooth, in 2008 produced an average of 12 524 thousand bags of coffee, each 60 kg, of which 3 005 tones are coffee cherry, these large volumes produced post- harvest, are considered contaminants. These products can be used to produce organic fertilizer. The traditional composting process takes about 150 days because of that the decreasing time to 40 days, it is proposed. Isolation of microorganisms from a pre-enrichment in a basal medium cherry Saline (MBS) to obtain axenic cultures, were identified and tested for compatibility between the consortia to select strains tested. Four 4 biopiles were made with a weight of 175 kg each one and one control. They were inoculated by spraying with a concentration of 3 x 107 CFU/mL during 10, 20 and 30 days, with monitoring of physical parameters. They were isolated and identified 8 strains: Pseudomonas aeruginosa, Citrobacter koseri, Bacillus sp, Escherichia coli, Stenotrophomona maltophilia, Cromobacterium spp, Pseudomonas spp. The carbonnitrogen (C/N) ratio in the stack 1 (9.6 %), in the stack 2 (10 %), and the pile 4 (9.5 %) fulfilled the established values (< 20 %), showing maturity and sanitary quality with low levels of fecal coliform and total absence of Salmonella. The results in 40 days allowed a compost that meets the parameters established by the Colombian technical standard (5167 NTC, 2004).
- PublicaciónAcceso abiertoBiopolymeric pellets of polyvinyl alcohol and alginate for the encapsulation of Ib-M6 peptide and its antimicrobial activity against E. coli(Heliyon, 2019-05-29) Flórez Castillo, Johanna-Marcela; Ropero Vega, José Luis; Perullini, Mercedes; Jobbágy, Matias; CIBASThe encapsulation of Ib-M6 antibacterial peptide in pellets of polyvinyl alcohol (PVA) and polyvinyl alcoholalginate (PVA-Alg) matrices was carried out in order to explore its controlled release and activity against Escherichia coli K-12. The pellets were obtained by combined ice segregation induced self-assembly (ISISA) and freezing-thawing methods and their microstructure was studied by scanning electron microscopy. Bromothymol blue was used as a model compound to study the transport mechanisms and release from pellets. The results show that there is a significant effect of the total concentration of PVA precursor solutions, the mass ratio of PVA of different molecular weights and the addition of alginate on the microstructure and transport properties of pellets. The antibacterial activity of Ib-M6 against Escherichia coli K-12 was not affected by the encapsulation in PVA pellets. However, the release of Ib-M6 from PVA-Alg pellets was not possible, probably due to the electrostatic interaction of positively charged Ib-M6 and negatively alginate structure. Nonetheless, the controlled release of Ib-M6 from polymeric matrices can be fitting by modifying parameters such as the concentration and type of polymer precursors.
- PublicaciónAcceso abiertoEnzymatic transesterification ofwaste frying oil from local restaurants in east colombia using a combined lipase system(MDPI, 2020-05-21) Ferreira-Vela, Mary Angélica; Acevedo-Páez, Juan Camilo; Urbina-Suarez, N A; Rangel-Basto, Yeily Adriana; González-Delgado, Ángel Darío; EurekaThe search for innovation and biotechnological strategies in the biodiesel production chain have become a topic of interest for scientific community owing the importance of renewable energy sources. This work aimed to implement an enzymatic transesterification process to obtain biodiesel from waste frying oil (WFO). The transesterification was performed by varying reaction times (8 h, 12 h and 16 h), enzyme concentrations of lipase XX 25 split (14%, 16% and 18%), pH of reaction media (6, 7 and 8) and reaction temperature (35, 38 and 40 °C) with a fixed alcohol–oil molar ratio of 3:1. The optimum operating conditions were selected to quantify the amount of fatty acid methyl esters (FAMEs) generated. The highest biodiesel production was reached with an enzyme concentration of 14%, reaction time of 8 h, pH of 7 and temperature of 38 °C. It was estimated a FAMEs production of 42.86% for the selected experiment; however, best physicochemical characteristics of biodiesel were achieved with an enzyme concentration of 16% and reaction time of 8 h. Results suggested that enzymatic transesterification process was favorable because the amount of methyl esters obtained was similar to the content of fatty acids in the WFO.
- PublicaciónRestringidoEvaluación de dos Técnicas de secado en la Concentración de Proteína Unicelular a partir de Candida Utilis.(Cúcuta: Universidad de Santander, 2017, 2017-06-21) Florez Rivera, Jhoan Emmanuel.; Diaz Castañeda, Claudia-Elizabeth; Contreras Rangel, Jael.Con el crecimiento de las poblaciones humanas y el inminente cambio climático, los cuales hacen que la producción de alimentos a nivel mundial no de abasto, se hace imperativo plantearse la necesidad de desarrollar alternativas nutricionales, centradas en la economía, cortos tiempos de producción, bajos costos de producción y sobretodo una alta capacidad nutricional, es por ello que la biotecnología se muestra como la respuesta a estos planteamientos; uno de los posibles alimentos generados es la proteína unicelular, la cual presenta más beneficios que inconvenientes; en la presente se compararon dos métodos de producción de esta. El primero consistió en la aplicación de calor mediante la utilización de un horno a una °T de 50°C por 24 horas, permitiendo el contacto del producto que se busca secar con aire, para esto se deja abierta la puerta del horno; el segundo fue un método de secado por luz incandescente se realizó mediante la aplicación de una fuente de calor como lo fue una bombilla de alógeno a la cual produce una intensidad calórica de 80°C durante 4 horas, tras la obtención de resultados y análisis de los mismos se observó que el método de secado más productivo en cuanto a la generación de proteína unicelular, fue el realizado mediante la aplicación de calor incandescente, el cual tuvo una mayor eficiencia en cuanto a cantidad o productividad de proteína unicelular; mientras que el método el sustrato más adecuado para la producción de proteína unicelular, fue el de lactosuero.
- PublicaciónAcceso abiertoEvaluación Operacional de Procesos Biotecnológicos Aerobio, Anaerobio y Combinado Para el Tratamiento de Aguas Residuales Domésticas(2022-08-18) Mantilla-Moreno, Ana Maria; Barrios-Caballero, Manuel Antonio; Galvis-Caballero, Angel; Agualimpia-Valderrama, Bayron EnriqueActualmente, el tratamiento de aguas residuales domésticas sigue procesos biotecnológicos con capacidad de degradar materia orgánica, ya sea mediante reacciones de fermentación (anaerobio) u oxidación (aerobio). Con el fin de establecer la viabilidad de un sistema combinado aerobio-anaerobio se realizó una evaluación de estos procesos individualmente y conjunto, a partir de un análisis bibliométrico y vigilancia tecnológica de la temática, seguido de una caracterización físico-química y microbiológica de los parámetros influyentes en los procesos, para finalizar con un análisis de las cinéticas microbianas involucradas en la disminución de carga orgánica de cada sistema por separado y como sistema mixto, según la relación entre eficiencia y producto. Metodológicamente, se trató de un estudio de corte transversal que evaluó la capacidad de degradación de materia orgánica disuelta en aguas residuales municipales desde su entrada al sistema hasta el vertimiento del agua tratada en una fuente hídrica. Para determinar ventajas y desventajas de cada proceso por separado y en conjunto, se hizo el análisis de muestras recolectadas a partir de monitoreos semanales con un total de 2800 muestras de aguas residuales domésticas, durante un año, desde cuatro puntos a la entrada y salida del sistema combinado y 54 muestras de lodo tomadas también semanalmente de cada sistema durante el año 2019. Además, se realizaron mediciones periódicas usando métodos térmicos, título-métricos, potenciométricos y espectrofotométricos con las metodologías normalizadas por el Standard Methods, con el fin de caracterizar los procesos fisicoquímica y microbiológicamente y comparar niveles de eficiencia obtenidos en cada proceso autónomo y en correlación. Entre los resultados se destacaron la caracterización de aguas residuales durante los procesos aislados y combinado con los parámetros más representativos y la identificación del porcentaje de remoción de 70% por parte del proceso combinado junto con la presencia de células no viables en lodos que no se encuentran estabilizados.
- PublicaciónAcceso abiertoManual Para el Proceso de Selección, Recolección y Procesamiento de Material Genético Bovino Embriones, Ovocitos y Semen Para Exportación en Latinoamérica Para la Empresa Biotecnología Ganadera La Esmeralda(Universidad de Santander, 2022-06-16) Duran-Camargo, Laura Lucia; Quimbaya-Ramirez, John Jaime; Tapias-Rivera, JohannaEste proyecto fue realizado por Laura Lucía Durán Camargo, estudiante de Medicina Veterinaria de la UDES, aplicado a la empresa Biotecnología Ganadera La Esperanza, donde se elaboró un manual de proceso de selección, recolección y procesamiento de material genético bovino (embriones, ovocitos y semen) para exportación en Latinoamérica, con el principal objetivo de ofrecer a la empresa Ganadera La Esmeralda la información necesaria, ordenada y suficiente para la exportación de material genético bovino. En la actualidad la empresa requiere de un manual de procedimientos que permita la estandarización y desarrollo de prácticas propias en los procesos de selección, recolección y procesamiento de material genético, el cual generará el máximo aprovechamiento de los recursos humanos, técnicos, científicos y económicos. Con la estandarización de los procesos la empresa satisfará de manera notable la demanda y diversidad de material genético a productores del sector pecuario de la región y de Latinoamérica cumpliendo con las exigencias propias del mercado. La metodología parte de la identificación de procedimientos a través de información de plataformas científicas actuales, analizando y logrando la unificación de procedimientos que conllevarán a la propuesta de elaboración del manual. Como resultado, el diseño del manual de procedimiento logra estandarizar la selección, recolección y procesamiento del material genético bovino para la empresa Biotecnología Ganadera La Esmeralda, como guía para la coordinación, dirección, control y consulta de actividades a realizar en la misma, vinculando a personal profesional que satisfaga la calidad de la demanda de los servicios que actualmente puede ofrecer la empresa.