Introducción: La enfermedad de Chagas es causada por Trypanosoma Cruzi (T.cruzi), afecta principalmente el corazón causando cardiopatía chagásica en la etapa crónica de la enfermedad, estos pacientes tienen como única opción de tratamiento el trasplante de corazón, a su vez deben ser tratados con Benznidazol e inmunosupresores como la Ciclosporina A. Objetivo: Determinar la generacióndel anión superóxido en cardiomiocitos humanos (AC16) infectados con T.cruzi, tratados con Benznidazol y Ciclosporina A. Métodos y materiales: Cardiomiocitos humanos AC16 fueron infectados con T.cruzi, tratados con Benznidazol y/o Ciclosporina A, para la detección del anión superóxido se usó Hidroetidina (HE). La intensidad de la fluorescencia se midió con el microscopio invertido Eclipse Ti-S (Nikon) con los filtros de excitación a 485nm y emisión de 580nm y el análisis de las imágenes fue realizado con el programa Prism-Graphpad. Resultados: De acuerdo con la intensidad de fluorescencia emitida se observó que las células AC16 cuando fueron tratadas con Benznidazol y Ciclosporina A, emitieron una fluorescencia de 32.89 % y 28.48% respectivamente, similares al control positivo24,96 % evidenciando una mayor presencia de anión superóxido en comparación con los otros grupos celulares de la línea AC16 trabajados. Conclusiones: El tratamiento con Benznidazol y Ciclosporina A son generadores de Especies Reactivas de Oxígeno (EROs) entre ellas el anión superóxido, por esta razón es importante estudiar nuevos tratamientos que sean efectivos y generen menos EROs, para así evitar efectos nocivos en los pacientes con enfermedad de Chagas.