Captura del GEF-MADD para RAB27B en la línea celular MDA-MB231
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Resumen en ingles
Cancer according to the World Health Organization (WHO) is defined as an uncontrolled process of cell division in which some cells have a state of immortality1. It presents with six biological capacities acquired during its development: proliferative signaling resistance, evasion of growth suppressors, resistance to cell death, allowing replicative immortality, induction of angiogenesis which triggers invasion and metastasis2. For 2015, 8.8 million deaths were attributed to this disease in the entities: the Pulmonary form presented 1.69 million deaths, the Hepatic 788 000, the Colorectal 774 000, the Gastric 754 000 and the Mammary 571 000 deaths3; determining this form the importance of this work based on MDA-MB-231 cells (Adenocarcinoma of human breast). The objective of this work is to obtain the necessary tools to capture the specific GEF-MADD of the GTPase Rab27B involved in the development of breast cancer12 and in this way elucidate the cellular signaling pathways. The resources to accomplish the objectives are facilitated by Dr. Guadalupe Reyes Cruz, director of the Laboratory No. 19 of the Department of Cell Biology located in the Center for Research and Advanced Studies of the National Polytechnic Institute (CINVESTAV-IPN) in Mexico City. Techniques similar to immunoblotting (Western Blot) were standardized to visualize the MADD protein and constructions were carried out by PCR and subcloning for mutants of Rab27B and Rab11 with the purpose of characterizing the interactions that can be generated.
Resumen en español
El cáncer según la organización mundial de la salud (OMS) se define como un proceso descontrolado de la división celular en el que algunas células presentan un estado de inmortalidad1. Presenta con seis capacidades biológicas adquiridas durante su desarrollo: mantenimiento de señalización proliferativa, evasión de los supresores del crecimiento, resistencia a la muerte celular, permitir la inmortalidad replicativa, inducción de angiogénesis lo que desencadena la invasión y la metástasis2. Para el 2015 se atribuyeron a esta enfermedad 8,8 millones de defunciones en las cuales la forma Pulmonar presentó 1,69 millones de muertos, el Hepático 788.000, el Colorrectal 774.000, el Gástrico 754.000 y el Mamario 571.000 de muertes3; determinando de esta forma la importancia de este trabajo basado en células MDA-MB-231 (Adenocarcinoma de mama humano). El objetivo de este trabajo es obtener las herramientas necesarias para capturar al GEF-MADD específico de la GTPasa Rab27B involucrada en el desarrollo del cáncer de mama12 y de esta forma dilucidar dichas vías de señalización celular. Los recursos para cumplir los objetivos serán facilitados por la Dra. Guadalupe Reyes Cruz, directora del laboratorio N° 19 del Departamento de Biología Celular ubicado en el Centro de Investigaciones y de Estudios Avanzados del instituto politécnico nacional (CINVESTAV-IPN) en la ciudad de México. Se estandarizaron distintas técnicas como la de inmunotransferencia (Western Blot) para visualizar la proteína MADD y se realizaron construcciones por PCR y subclonaciones para mutantes de Rab27B y Rab11 con el propósito de caracterizar las interacciones que se puedan generar.