Estudio de un modelo Murino de leishmaniasis cutánea causada por Leishmania (Viannia) braziliensis : Estudio piloto
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Resumen en ingles
Leishmaniasis is a parasitic disease caused by protozoa of different species of the genus Leishmania spp. This disease presents three different clinical manifestations: Cutaneous, mucocutaneous and visceral. Its distribution is worldwide and in Colombia the cutaneous and mucus-like form produced by L. (Viannia) braziliensis is the most prevalent. Treatment withdrawal, parasitic drug resistance, as well as drug associated side effects have boosted research for new therapeutic alternatives. Thus, th2qd ae establishment of an in vivo model which allows the advance of in vitro studies for new potential antiparasitic molecules is important. Here, we studied a cutaneous Leishmaniasis infection model caused by L. (Viannia) braziliensis in 6 - 8 weeks old female Balb / c mice. The animals were infected with promastigotes at the base of the tail. One week post-infection, testosterone enanthate intramuscular injection was performed in order to cause immunosuppression. The lesions were 4 monitored two days / week and animal weight was weekly accessed. After 16 weeks, the animals were euthanized and we performed the respective (i) hematological analysis, (ii) evaluation of liver-renal function and (iii) histopathological study of spleen, liver and skin. In summary, no lesions were detected throughout the study. Moreover, renal enzymes activity and creatinine collected data were below reference values. Meanwhile, BUN and transaminases presented a significant increase, which could indicate a level of liver failure. Additionally, no histopathological changes and morphological variation of the organs were observed besides increased size. We also observed that the parasitic load was null or undetectable. We propose an adjustment of strain reactivation protocol used in the pilot study, once we observed a lack of infectivity. Finally, we will reassess the handling of the experimental conditions before, during and after the test.
Resumen en español
La leishmanisiasis es una enfermedad parasitaria producida por protozoos de diferentes especies del género Leishmania spp, manifestandose de tres principales formas: Cutánea, mucocutanea y visceral. Su distribución es mundial, en Colombia la forma cutánea y mucocutánea producida por L. (Viannia) braziliensis es la más prevalente. El abandono del tratamiento dado la vía de administración y la resistencia del parasito a los medicamentos utilizados, así como los eventos adversos de los medicamentos han potencializando la investigación para nuevas alternativas terapéuticas. De esta manera, surge la importancia de establecer un modelo in vivo, que permita el avance de los estudios in vitro de nuevas moléculas con potencial antiparasitario. En este trabajo se estudió un modelo de infección de Leishmaniasis cutánea causada por L. (Viannia) braziliensis en ratones Balb/c hembra entre 6 - 8 semanas, los cuales fueron infectados con promastigotes en la base de la cola. Una semana post-infección, fueron inyectados intramuscularmente con enantato de testosterona 2 a fin de causar inmunosupresión. Las lesiones fueron monitoreadas dos días/semana y a su vez pesaje semanal. Luego de 16 semanas, se realizó el sacrificio para los respectivos análisis hematológicos, evaluación de función hepática- renal y estudio histopatológico de bazo, hígado y piel. Durante el estudio, no se observó desarrollo de la lesión. Respecto a las enzimas renales, la creatinina se encontró por debajo de los valores de referencia, el BUN mostró un aumento significativo, al igual que las transaminasas, indicando posiblemente un problema hepático. Adicionalmente no se observaron cambios histopatológicos ni variación morfológica de los órganos, pero si aumento de tamaño. También se determinó la carga parasitaria, siendo nula. Se hace necesario la reactivación de la cepa utilizada para el ensayo piloto dada la nula infectividad, así mismo, el manejo adecuado de las condiciones experimentales antes, durante y después del ensayo.