Cambios en el perfil proteico de E. coli O157:H7 frente al tratamiento con Ib-M1 e IONP@Ib-M1
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Resumen en español
Escherichia coli O157:H7 es una bacteria patógena responsable de enfermedades transmitidas por alimentos y reconocida por su capacidad de resistencia a diversos antibióticos; razón por la cual, se generan complicaciones en el tratamiento de infecciones producidas por esta bacteria. El péptido Ib-M1 libre e inmovilizado en nanopartículas magnéticas de óxido de hierro (IONP@Ib-M1) ha surgido como una nueva alternativa antimicrobiana contra E. coli O157:H7 y aislados clínicos de esta bacteria. El mecanismo de acción de Ib-M1 e IONP@Ib-M1 contra E. coli O157:H7 aún es desconocido; por lo tanto, el objetivo de esta investigación fue la identificación del cambio en el perfil de proteínas de E. coli O157:H7 luego del tratamiento con Ib-M1 e IONP@Ib-M1 como primer paso para determinar su mecanismo de acción. Para esto, se llevó a cabo la obtención de proteínas, posteriormente se llevó a cabo una electroforesis bidimensional para finalmente realizar la determinación de la variabilidad de los perfiles proteicos. Una vez obtenidos los perfiles proteicos se llevó a cabo un análisis de varianza (ANOVA). Los resultados muestran la identificación de proteínas expresadas diferencialmente y las cuales se encuentra involucradas en procesos de quimiotaxis, síntesis y mantenimiento de proteínas, procesos redox, crecimiento celular, transporte de aminoácidos e inhibición de traducción.
Resumen en ingles
Escherichia coli O157:H7 is a pathogenic bacterium that causes Foodborne Diseases. These diseases become a public health problem since strains resistant to different antibiotics have been found. The Ib-M1 peptide and its bioconjugate in magnetic iron oxide nanoparticles (IONP@Ib-M1) have emerged as a new antimicrobial alternative against E. coli O157:H7 and clinical isolates. The mechanism of action of Ib-M1 and IONP@Ib-M1 against E. coli O157:H7 is still unknown, therefore, the objective of this research is to identify the change in the protein profile of E. coli O157:H7 after treatment with Ib-M1 and IONP@Ib-M1, as a first step to determine the mechanism of action on the pathogen. For this, the obtaining of intracellular proteins was carried out, subsequently a two-dimensional electrophoresis was carried out to finally carry out the determination of the variability of the protein profiles. Once the protein profiles were obtained, an analysis of variance (ANOVA) was carried out. The results show the identification of proteins differentially expressed and which are involved in chemotaxis, protein synthesis and maintenance, redox processes, cell growth, amino acid transport, and translation inhibition.
Resumen
Escherichia coli O157: H7 é uma bactéria patogênica que causa doenças transmitidas por alimentos; Essas doenças se tornam um problema de saúde pública desde que foram encontradas cepas resistentes a diferentes antibióticos. O peptídeo Ib-M1 e seu bioconjugado em nanopartículas magnéticas de óxido de ferro (IONP@Ib-M1) emergiram como uma nova alternativa antimicrobiana contra E. coli O157:H7 e isolados clínicos. O mecanismo de ação de Ib-M1 e IONP@Ib-M1 contra E. coli O157:H7 ainda é desconhecido, portanto, o objetivo desta pesquisa é identificar a alteração no perfil proteico de E. coli O157:H7 após o tratamento com Ib-M1 e IONP@Ib-M1, como primeiro passo para determinar o mecanismo de ação do patógeno. Para isso, foi realizada a obtenção de proteínas intracelulares; posteriormente, foi realizada uma eletroforese bidimensional para finalmente realizar a determinação da variabilidade dos perfis de proteínas. Uma vez obtidos os perfis proteicos, foi realizada uma análise de variância (ANOVA). Os resultados mostram a identificação de proteínas diferencialmente expressas e envolvidas em processos de quimiotaxia, síntese e manutenção de proteínas, processos redox, crescimento celular, transporte de aminoácidos e inibição da tradução.