Anti-Candida albicans y Antiinflamatorio In vitro de Mezclas Optimizadas de Lippia alba Aplicadas Sobre Membranas de Regeneración Ósea Guiada (ROG)
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Resumen en español
La Regeneración Ósea Guiada (ROG) es una técnica de aumento de reborde que a menudo requiere el uso de membranas. Estas actúan como barrera física facilitando la compartimentación de células con potencial de regeneración y excluyendo células epiteliales. La falta de propiedades osteoconductoras, la inflamación y la infección son las limitaciones más frecuentes en ROG, que requieren terapias de apoyo con biocidas, antibióticos y antiinflamatorios, que pueden promover la disbiosis y la resistencia a los antimicrobianos. Para optimizar las propiedades inmunorresistentes y antifúngicas de las membranas de colágeno, el objetivo de este trabajo fue estudiar aditivos profilácticos basados en mezclas sinérgicas de clorhexidina con fracciones enriquecidas de aceites esenciales de Lippia alba. Las combinaciones del biocida con fracciones ricas en citral y limoneno demostraron aumentar de dos a ocho veces, respectivamente, el rendimiento anti-Candida albicans de la clorhexidina, en términos de concentración inhibitoria mínima. Como pretratamientos en membranas, estas mezclas potenciaron hasta cuatro veces la acción inhibidora del crecimiento de C. albicans de la clorhexidina, en superficies. En células de macrófago murino J774A.1, se evidenció una interacción farmacológica antagónica (citoprotector) entre las fitoterapias y la clorhexidina, provocando un aumento al doble de la Concentración Citotóxica 50 biocida (CC50) y minimizando sus efectos tóxicos sobre la adhesión celular, membrana celular, potencial mitocondrial y la integridad nuclear. En los macrófagos, las fracciones enriquecidas con citral también favorecen las propiedades de respuesta inmunitaria de las membranas de colágeno (solas o en combinación con clorhexidina) aumentando la citoquina TNF-α al mismo tiempo que aumenta IL-4. Así, esta terapia combinada representa una plataforma prometedora para el desarrollo de una solución biocida profiláctica o terapéutica capaz de optimizar las características farmacológicas de la clorhexidina, tanto en su tolerancia epitelial como en su acción para prevenir la consolidación de C. albicans en la superficie de la membrana.
Resumen en ingles
In dental rehabilitation with implants, Guided Bone Regeneration (GBR) is a ridge technique often required for successful bone augmentation through membranes. These devices act a physical barrier facilitating the compartmentalization of cells with potential in osseous regeneration and excluding cells impeding bone formation. Lack of osteo-conducting properties, inflammation, and infection are the most often limitations in GBR, requiring biocidal, antibiotic, and anti-inflammatory support therapies, which can promote dysbiosis and antimicrobial resistance. To optimize the immune-responsive and antifungal properties of GBR-resorbable membranes (collagen), the aim of this work was to study prophylactic additives based in synergistic mixtures of chlorhexidine with terpene-enriched fractions from Lippia alba essential oils. Combinations of the biocide with citral- and limonene-rich fractions showed to increase from twice to eight times, respectively, the anti-Candida albicans performance of chlorhexidine, in terms of minimum inhibitory concentration. As pretreatments on membranes, these mixtures potentiated up to four times the C. albicans-growth inhibitory action of chlorhexidine, on surfaces. On murine macrophage J774A.1 cells, an antagonistic pharmacologic interaction (cytoprotective) was evidenced between phytotherapies and chlorhexidine, causing an increase in twice of the biocidal Cytotoxic Concentration 50 (CC50) and minimizing its toxic effects on cell adhesion, cell membrane, mitochondrial potential, and nuclear integrity. On macrophages, citral-enriched fractions also favor the immune-responsive properties of collagen membranes (alone or in combination with chlorhexidine) increasing the osteogenic TNF-α cytokine while increasing the inhibitory IL-4. Thus, this combined therapy represents a promising platform for the development of a prophylactic (attached to membranes) or therapeutic biocidal solution able of optimizing the pharmacological characteristics of chlorhexidine, both in its epithelium tolerance and in its action to prevent C. albicans consolidation on the membrane surface. Due to their ability to stimulate a regulated inflammatory response, this therapy may also contribute to the role of collagen membranes as bone healing promoting agents.