Publicación:
Evaluación de técnicas de conservación para microorganismos de importancia en microbiología industrial en el Cepario de la Universidad de Santander.

Página de artículo simple
dc.contributor.advisorPardo Casas, Marithzaspa
dc.contributor.authorAcosta Ovallos, Angy Karolinaspa
dc.date.accessioned2019-09-25T23:32:39Zspa
dc.date.available2019-09-25T23:32:39Zspa
dc.date.issued2019-06-28spa
dc.description98 p.spa
dc.description.abstractLa preservación microbiana construye un paso importante para asegurar el mantenimiento del gran potencial biotecnológico del genoma bacteriano. La correcta conservación microbiana deberá garantizar la preservación de cultivos axenicos, con altos porcentajes de viabilidad y estabilidad genética. Objetivo: Evaluar técnicas de conservación para microorganismos de importancia en microbiología industrial en el cepario de la Universidad de Santander, mediante la evaluación de la eficiencia de los métodos de conservación (Glicerol al 30%, Leche descremada al 20%, Agua Estéril y papel de filtro) y determinando del porcentaje de viabilidad y pureza en un periodo de 3,6 y 12 meses en 14 cepas. Métodos: la población objeto de estudio estuvo constituida por 14 cepas microbianas, 8 de ellas bacterias y 6 cepas de Hongos Filamentosos sometidas a 3 métodos de conservación cada uno. Resultados: Los métodos de conservación evaluados mostraron resultados satisfactorios con alta tasa de supervivencia de 1,34 UFC/mL para bacterias Gram Negativas y 1,57 UFC/mL para bacterias Gram Positivas. Con esta condición de conservación obtuvimos 95,7% para Bacterias Gram Negativas y 98,3% para Bacterias Gram Positivas de recuperación de viabilidad a los 12 meses de conservación como resultado promedio. Cabe resaltar que este primer informe de conservación fue muy eficiente ya que los microorganismos se mantuvieron en todo el proceso. Conclusión: Se evaluaron métodos exitosos de conservación, para las cepas microbianas estudiadas, incluyendo los hongos filamentosos que lograron mantenerse con buena esporulación hasta el final. El metodo de Glicerol permitió una viabilidad del 99,2% en Glicerol al 30%, 98,5% en Leche descremada al 20% y 93,3% en Papel de filtro a los 12 meses de conservación.spa
dc.description.abstractMicrobial preservation constructs an important step to ensure the maintenance of the great biotechnological potential of the bacterial genome. The correct microbial preservation must guarantee the preservation of axenic cultures, with high percentages of viability and genetic stability. Objective: To evaluate conservation techniques for microorganisms of importance in industrial microbiology in the University of Santander stock, by evaluating the efficiency of conservation methods (30% glycerol, 20% skim milk, sterile water and waste paper). Filter) and determining the percentage of viability and purity in a period of 3.6 and 12 months in 14 strains. Methods: the population studied consisted of 14 microbial strains, 8 of them bacteria and 6 Strains of Filamentous Fungi with 3 conservation methods each. Results: Conservation methods evaluated satisfactory results with a high survival rate of 1.34 CFU / ml for Gram-negative bacteria and 1.57 CFU / ml for Gram-positive bacteria. With this conservation condition, we obtained 95.7% for Gram-negative bacteria and 98.3% for Gram-positive bacteria for recovery of viability at 12 months of conservation as an average result. It should be noted that this first conservation report was very efficient since microorganisms were maintained throughout the process. Conclusion: Successful conservation methods were evaluated for the microbial strains studied, including the filamentous fungi that were achieved with good sporulation until the final. The Glycerol method allows a viability of 99.2% in Glycerol at 30%, 98.5% in List described at 20% and 93.3% in Filter paper at 12 months of storage.eng
dc.description.degreelevelPregradospa
dc.description.degreenameMicrobiólogo Industrialspa
dc.description.tableofcontentsIntroducción .................................................................................................................................... 1 1. Planteamiento del problema y justificación ............................................................................. 3 2. Objetivos ................................................................................................................................... 5 1.1 Objetivo General ................................................................................................................ 5 1.2 Objetivos Específicos ........................................................................................................ 5 2. Marco teórico ............................................................................................................................ 6 2.1 Estado del Arte.................................................................7 2.2 Colecciones de Microorganismos ........................................................................................... 8 2.3 Conservación y Preservación de Microorganismos ........................................................... 9 2.3.1 Métodos de Conservación a largo plazo. ............................................................... 10 2.3.2 Métodos de conservación alternativos ................................................................... 12 2.3.3 Métodos restringidos. ............................................................................................ 13 2.3.4 Crioprotectores. ..................................................................................................... 16 2.4 Curva de Crecimiento Bacteriano .................................................................................... 17 2.5 Sistemas de Identificación BBL Crystal .......................................................................... 21 2.6 Mantenimiento y viabilidad en Hongos Filamentosos .................................................... 30 3. Metodología ............................................................................................................................ 31 3.1 Tipo de Estudio ................................................................................................................ 31 3.2 Área de Estudio ................................................................................................................ 31 3.3 Universo ........................................................................................................................... 31 3.4 Población ......................................................................................................................... 32 3.5 Material Biológico ........................................................................................................... 32 3.6 Métodos ........................................................................................................................... 33 3.6.1 Recuperación de los microorganismos .................................................................. 33 3.6.2 Cinética de Crecimiento. ....................................................................................... 34 3.6.3 Conservación de Bacterias Gram (+) y Bacterias Gram (-). Para las bacterias Gram (+) y Gram (-) se probaran 3 métodos de conservación los cuales serán descritos posteriormente. ............................................................................................................... 35 3.6.4 Conservación de Hongos. ...................................................................................... 37 3.6.5 Evaluación de los métodos de Conservación. ........................................................ 38 3.6.6 Diseño del Manual de protocolos de mantenimiento, preservación y verificación de microorganismos del cepario de la Universidad de Santander .................................. 41 4. Resultados ............................................................................................................................... 42 4.1 Bacterias Gram Negativas ............................................................................................... 42 4.1.1 Escherichia coli ..................................................................................................... 42 4.1.2 Pseudomonas aeruginosa ...................................................................................... 45 4.1.3 Citrobacter freundii ............................................................................................... 47 4.1.4 Serratia marcenscens ............................................................................................. 50 4.2 Bacterias Gram Positivas ................................................................................................. 54 4.2.1 Bacillus cereus ....................................................................................................... 54 4.2.2 Bacillus licheniforms ............................................................................................. 57 4.2.3 Bacillus thuringiensis ............................................................................................ 59 4.2.4 Listeria monocytogenes ......................................................................................... 62 4.3 Hongos Filamentosos ....................................................................................................... 66 4.3.1 Evaluación de la morfología macroscópica y microscópica. Teniendo en cuenta las descripciones morfológicas macroscópicas y microscópicas de los hongos reportados bibliográficamente, se procedió a la observación e identificación de cada cepa, determinando así la estabilidad morfológica de cada cepa. ............................................ 66 4.4 Manual de protocolos de mantenimiento, preservación y verificación de microorganismos del cepario de la Universidad de Santander. (Ver Apéndice A) ............... 70 5. Discusión ................................................................................................................................ 71 6. Conclusiones ........................................................................................................................... 75 7. Recomendaciones ................................................................................................................... 77 Referencias .................................................................................... 78spa
dc.description.versionEj. 1spa
dc.format.mimetypeapplication/pdfspa
dc.identifier.localT 33.19 A168espa
dc.identifier.urihttps://repositorio.udes.edu.co/handle/001/3756spa
dc.language.isospaspa
dc.publisherBucaramanga : Universidad de Santander, 2019spa
dc.publisher.facultyFacultad de Ciencias Exactas, Naturales y Agropecuariasspa
dc.publisher.programMicrobiología Industrialspa
dc.relation.referencesAllievi, L., and Salardi,C. 1993. Frozen storage (-20ºC and -80ºC) of soybean Bradyrhizobium cell suspension.Microb. 16: 196-08.spa
dc.relation.referencesÁngel, D. (2006). Evaluación de técnicas de conservación para hongos filamentosos y levaduriformes en el cepario de la Pontificia Universidad Javeriana. Bogotá, Colombia.spa
dc.relation.referencesArakawa, T., Carpenter, J.F., Kita, Y.A., Crowe, J.H. 1990. The basis for toxicity of certain cryoprotectants: A hypothesis. Criobiology. 27: 401-415.spa
dc.relation.referencesBashan, Y. 1998. Inoculants of plant growthpromoting bacteria for use in agriculture.Biotechnol. Adv. 16: 729-770.spa
dc.relation.referencesCastro, G.; Hernández, JT. (2000). Manual sobre conservación de microorganismos. México: Instituto Politécnico Nacional. Escuela Nacional de ciencias Biológicas. pp. 21.spa
dc.relation.referencesCiba. 1977. The freezing of mammalian embryos. Ciba Found. Symp. 52.Excerpta Medica, North-Holland,Amsterdam. p.330.spa
dc.relation.referencesCooper, V.S. 2002. Long-term experimental evolution in Escherichia coli.Quantifying the fundamental and realized niche.BMC Evol.Biol. 2: 12.spa
dc.relation.referencesCrist, D.K., R.E. Wyza, K.K. Mills, W.D. Bauer. 1984. Preservation of Rhizobium viability and symbiotic infectivity by suspension in water.Appl. Environ. Microbiol. 47:895-900,spa
dc.relation.referencesDate, R.A. and J. Halliday. 1987. Collection, isolation, cultivation and maintenance of Rhizobia.Technology. New York, P.413-428.spa
dc.relation.referencesDevay, J. E. and W,C, 1963. Schanothorst. Single cell isolation and preservation of bacterial cultures. Nature. 199: 775-777.spa
dc.relation.referencesFages, J. 1990. An optimized process for manufacturing an Azospirilluminoculants for crops. Appl. Microbiol. Biotechnol. 32: 473-478.spa
dc.relation.referencesFahy, G.M. 1986. The relevance of cryoprotectant toxicity to cryobiology. Cryobiology. 23: 1-13,spa
dc.relation.referencesFahy, G.M., MacFarlane,D.R., Angell, C.A., 1987. Meryman, H.T. Vitrification as an approach to cryopreservation. Cryobiology. 2 1 : 407-426.spa
dc.relation.referencesGarcía, L., Scherer, C., Rodríguez, R. Supercooled liquids and glasses. Science for all digital library. Physics. Economic Culture. México.1991.spa
dc.relation.referencesGarcía, M.D.; And Uruburu, F. (2000). Conservación de cepas microbianas. SEM 30: 12-16, celularspa
dc.relation.referencesGutierrez, S. J. 2006. Fundamentos de ciencias básicas aplicadas a la odontología. 1 ed. Harrison AP. (1955). Survival of bacteria upon repeated freezing and hawing. Journal of Bacteriology; 70:711-5spa
dc.relation.referencesHernandez, D. (2014). Selección de un método para la conservación y preservación de Actinomicetos aislados del suelo del Jardín Botánico de la Universidad Tecnológica de Pereira. Pereira, Risaralda.spa
dc.relation.referencesHernandez, D. 2014. Selección de un método para la conservación y preservación de Actinomicetos aislados del suelo del Jardín Botánico de la Universidad Tecnológica de Pereira. Pereira, Risaralda.spa
dc.relation.referencesHill LR. Living Resources for Biotechnology. Cambridge: Cambridge Edition; 2000.spa
dc.relation.referencesHubalek, Z. (2003). Review. Protectants used in the cryopreservation of microorganisms. Criobiology. 46: pp. 205-229.spa
dc.relation.referencesHuertas, S.; Pérez, M.; Berna, Z. y Montoya, D. (2006). Implementación y evaluación de dos métodos de conservación y generación de la base de datos del banco de cepas y genes del instituto de Biotecnología de la Universidad Nacional de Colombia Bogotá, Colombia (IBUN).spa
dc.relation.referencesJahnelm, F. 1937. Uber das Uberleben von Syphilis und Recurrensspirochaten sowie Sodukspirillen in flussigem Stickstoff (temperature -196ºC) und die Winwirkung anderer Kaltegrade auf diese. Mikroorganismen Klin Wschr. 16:1304–1305.spa
dc.relation.referencesJames, E.R. 1984. Maintenance of parasitic protozoa by cryopreservation. A manual of laboratory methods. Academic press. London. p.161-176.spa
dc.relation.referencesJong, S., Atkins, W.B. 1985. Conservation, collection and distribution of cultures. Marcel Dekker. New York, 153-194.spa
dc.relation.referencesKirsop, B. (1991). Maintenance of yeasts, Maintenance of Microorganisms and Cultured Cells – A Manual of Laboratory Methods, 2nd ed., (B.E. Kirsop and A. Doyle eds.), Academic Press, San Diego, pp. 161 – 182.spa
dc.relation.referencesKoneman, 2008. Diagnostico Microbiológico. Edición Medica Panamericana, 1691 paginas.spa
dc.relation.referencesMacfadyen, A., Rowland, S., 1900. Note on the influence of the temperature of liquid air on bacteria. The Lancet. 155 (3999):p.1130.spa
dc.relation.referencesMackie, R.I., Therion, J.J. Influence of mineral interactions on growthefficiency of rumen bacteria. In: Gilchrist, M.C., Mackie, R.I. (Ed.)Herbivore nutrition in sub-tropics and tropics. Craighall: Science Press, p.455-477.1984.spa
dc.relation.referencesMadigan, M., Marrs, B. Extremófilos. Inv y Ciencia. 249:60-66, 2003.spa
dc.relation.referencesMalik, K.A. Cryopreservation of bacteria with special reference to anaerobes. World Journal of Microbiology and Biotechnology. 7:629-632. 1991.spa
dc.relation.referencesManzanera, M., Vilchez, S. and Tunnacliffe, A. 2002. High survival and stability rates of Escherichia coli dried in hydroxyectione. FEMS Microbiol. Lett. 233: 347.spa
dc.relation.referencesMazur, P. 1970. The freezing of biological systems. Science N.Y. Cryobiology. 168, 939-949.spa
dc.relation.referencesMerck E. Principal’s methods of microorganism’s conservation. Darmstat. Merck KGAa Edition. Microbiology Manual. 2snd edition; 2000.p.407-10.spa
dc.relation.referencesMeryman, H.T1966. cryobiology. Academic Press, London and New York. Pp. 1-114.spa
dc.relation.referencesMiller, G.H. Experiments in Molecular Genetics. 3th Edit. New York: Cold Spring Harbor Laboratory, 1977.spa
dc.relation.referencesMorales, Y.E., Duque E., Rodriguez, O., Martinez, R.D and Muñoz R.J. 2010. Bacterias Preservadas, una Fuente Importante de Recursos Biotecnológicos. BioTecnología, Vol. 14 No. 2.spa
dc.relation.referencesMorris, G.J. 1981. Cryopreservation: An Introduction to Cryopreservation in Culture Collections. Cambridge, UK: Culture Centre of Algae and Protozoa.spa
dc.relation.referencesNakamura, Y. Real Time Information Systems for Seismic Hazards Mitigation Uredas, Heras andpic, Quarterly Report of RTRI, Vol. 37, No. 3, 112-127.1996.spa
dc.relation.referencesPalmfeldt,J., Radström, P., and Hahn-Hägerdal, B. 2003. Optimisation of initial cell concentration enhances freeze-drying tolerance of Pseudomonas chlororaphis.Cryobiology. 47: 21-29.spa
dc.relation.referencesPedroza, A.; Quevedo-Hidalgo, B. y Matiz, A. (2007). Manual de laboratorio de procesos biotecnológicos. Primera edición. Colección de apuntes, Editorial Pontificia Universidad Javeriana. Bogotá. ISBN: 978-958-716-029-1.spa
dc.relation.referencesPerry, S.F. 1995. Freeze-drying and cryopreservation of bacteria. Methods Mol.Biol. 38: 21-30. Potts, M. 1994. Desiccation tolerance of prokaryotes. Microbiol. Rev. 58: 755-805.spa
dc.relation.referencesReytor, D.C.; And Espinosa, A.E. (2010). Evaluación de la tolerancia a la crioconservación de dos cepas de Escherichia coli K12 de uso frecuente en biotecnología. Vol. 19. No 2.spa
dc.relation.referencesSnell J.J. General Introduction to Maintenance Methods. Maintenance of Microorganisms and ells. 2snd edition. London: B.E. Kirsop and A. Doyle (eds); 2001.spa
dc.relation.referencesStanbury, P.; Whitaker, A. 1987. Principles of fermentation technology. Pergamon Press, New York.p.17-53.spa
dc.relation.referencesUruburu, F. History and services of culture collections. Int. Microbiol. 6: 101- 103, 2003.spa
dc.relation.referencesVincent, J.M. 1979. A manual for the practical study of root nodule bacteria. IPB Handbook. No 15. p.11-17. Oxford.spa
dc.relation.referencesWasas,A. D., Huebner, R. E. M., De Blanche, and Kulgman, K. P. Long-term survival of Streptococcus pneumoniae at room temperature on Dorset eggmedium. J. Clin. Microbiol. 36, 1139–1140,1998.spa
dc.relation.referencesWeng Z, Díaz OE, Álvarez I. 2005. Conservación de microorganismos: ¿Qué debemos conocer?. Rev Cubana Hig Epidemiol [Internet]. Sep. [citado: 15 mayo 2006]; 43(3):0-0. Disponible en: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1561-30032005000300006&lng=esspa
dc.relation.referencesZuberer, D.A. 1987. Collection, isolation, cultivation and maintenance of associative N2-fixing bacteria. New York. p.95-122.spa
dc.rightsDerechos Reservados - Universidad de Santander, 2019spa
dc.rights.accessrightsinfo:eu-repo/semantics/openAccessspa
dc.rights.creativecommonsAtribución-NoComercial 4.0 Internacional (CC BY-NC 4.0)spa
dc.rights.urihttps://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/spa
dc.subject.proposalGram positive bacteriaspa
dc.subject.proposalGram negative bacteriaspa
dc.subject.proposalilamentous fungispa
dc.subject.proposalMethods of conservationspa
dc.subject.proposalBBL Crystal ID systemspa
dc.subject.proposalBacterias Gram Positivasspa
dc.subject.proposalBacterias Gram Negativasspa
dc.subject.proposalHongos Filamentososspa
dc.subject.proposalMétodos de conservaciónspa
dc.subject.proposalSistema de ID BBL Crystalspa
dc.titleEvaluación de técnicas de conservación para microorganismos de importancia en microbiología industrial en el Cepario de la Universidad de Santander.spa
dc.typeTrabajo de grado - Pregradospa
dc.type.coarhttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1fspa
dc.type.contentTextspa
dc.type.driverinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisspa
dc.type.redcolhttps://purl.org/redcol/resource_type/TPspa
dc.type.versioninfo:eu-repo/semantics/acceptedVersionspa
dspace.entity.typePublication
oaire.accessrightshttp://purl.org/coar/access_right/c_abf2spa
oaire.versionhttp://purl.org/coar/version/c_ab4af688f83e57aaspa
Archivos
Paquete original
Mostrando 1 - 1 de 1
Imagen en miniatura
Nombre:
Evaluacion de metodos de conservacion de microorganismos de importancia en Microbiologia Industrial de la Universidad de Santander.pdf
Tamaño:
1.86 MB
Formato:
Adobe Portable Document Format
Descripción:
Descargar
Paquete de licencias
Mostrando 1 - 1 de 1
No hay miniatura disponible
Nombre:
license.txt
Tamaño:
59 B
Formato:
Item-specific license agreed upon to submission
Descripción:
Descargar
Colecciones
ADBA. Trabajos de grado